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紫外可見分光光度計——關于比色皿

更新時間:2019-07-10      點擊次數:11632

比色皿( 又名吸收池,樣品池) 用來裝參比液、樣品液。配套在光譜分析儀器上,如分光光度計,血線蛋白分析儀,粒度分析儀等。比色皿是分光光度計的重要配件,一般為長方體,其底及兩側為磨毛玻璃,另兩面為光學玻璃制成的透光面粘結而成。

 比色皿的制造工藝有兩種, 一種是粘合劑粘合而成, 另一種是高溫熔融而成。比色皿的材料通常來源于石英、熔凝硅石和光學玻璃。常用比色皿的形狀有方形、矩形和圓筒形, 容量一般為幾毫升。也有用于少量試樣的微型或超微型毛細管皿。另外還有高、低溫恒溫比色皿。比色皿按照使用的波長范圍分為可見光系列(稱玻璃比色皿),紫外可見光系列(稱石英比色皿),紅外光系列(稱紅外石英比色皿)。

紫外光度實驗中的比色皿通常使用玻璃比色皿和石英比色皿,玻璃比色皿是用光學玻璃制成的比色皿,只能用于可見光區,適用于330~1000nm 波長范圍,石英比色皿是用熔融石英( 氧化硅) 制成的比色皿,既適用于紫外光區,也可用于可見光區,適用于200~400nm波長范圍。


利用石英和玻璃比色皿在紫外光區和可見光區有無吸收的差異,在紫外光區時,由于玻璃比色皿強烈吸收紫外光,對實驗數據和結果有影響,石英比色皿不吸收紫外光,不會影響數據,因此在紫外光區不使用玻璃比色皿而使用石英比色皿。而在可見光區,玻璃的影響非常小,可忽略,和石英比色皿一樣均可以使用,但考慮到節約經濟的因素,由于玻璃比色皿的價格遠遠低于石英比色皿,通常選擇可見光區使用玻璃比色皿,紫外光區使用石英比色皿。

一、比色皿的鑒別
1、直觀法
通過視覺、聽覺的不同感*法觀察和比較比色皿的外觀及澄清程度來進行辨別。
(1) 比色皿上通常會有字母標識,玻璃比色皿口沿處有“G”( Glass 玻璃) ,而石英比色皿口沿處有“Q”( Quartz 石英) 或者“QS /S”( Quartz Glass 石英玻璃) 。
(2) 如果沒有字母標識或者標識已磨損,可以在口沿處由上往下看,如果棱面發綠就是玻璃的,透明或發白就是石英的。更確切地說,普通玻璃的斷口是淺綠的,硼酸玻璃的斷口是泛白的,而石英的斷面是透明的。
(3) 可以聽聲辨別,石英敲擊的聲音比較清脆,玻璃器皿敲擊時發出的聲音發悶。
(4) 石英比玻璃的硬度大,如果把兩個比色皿對磨,石英比色皿磨損微小,而玻璃比色皿磨損比較大。
(5) 可用白熾燈照射,透光度高的是玻璃比色皿,而石英比色皿里面應當稍渾濁。


2、機試法

使用紫外可見分光光度計來鑒別玻璃、石英比色皿和配對比色皿。
現行國家檢定規程規定石英比色皿在250nm下吸光度應小于0.07abs,若吸光度大于0.07abs 則為玻璃比色皿。
比色皿內不放置任何樣品,以空氣為介質,波長設置250nm,調零。將比色皿放置在樣品道,吸光值小于0.07abs的是石英的,反之是玻璃的。

二、比色皿的使用
    在使用比色皿時,兩個透光面要*平行,并垂直置于比色皿架中,以保證在測量時,入射光垂直于透光面,避免光的反射損失,保證光程固定。
    比色皿一般為長方體,其底及兩側為磨毛玻璃,另兩面為光學玻璃制成的透光面采用熔融一體、玻璃粉高溫燒結和膠粘合而成。所以使用時應注意以下幾點。

  1.  拿取比色皿時,只能用手指接觸兩側的毛玻璃,避免接觸光學面。同時注意輕拿輕放,防止破損。
  2. 比色皿中不應長期盛放含有腐蝕玻璃物質的溶液。
  3.  比色皿高溫后易爆裂,因此不應放在火焰或電爐上加熱或干燥箱內烘烤。
  4. 當比色皿里面被污染,應用無水乙醇清洗,并晾干或及時擦拭干凈。
  5. 比色皿的透光面不應與硬物或臟物接觸。
  6. 盛裝溶液時,高度應為比色皿的2 /3 處,光學面如有殘液可先用濾紙輕輕吸附,然后再用鏡頭紙或絲綢擦拭。
  7. 比色皿中的液體,應沿毛面傾斜,慢慢倒掉,不要將比色皿翻轉,直接口向下放在干凈的濾紙上吸干剩余液,然后用蒸餾水沖洗比色皿內部倒掉(操作同上)避免液體外流,使第2次測量時不用擦拭比色皿,不致因擦拭帶來的誤差。
  8. 比色前將各個比色皿中裝入蒸餾水,在比色波長下進行比較,誤差在±0.001吸光度以內的比色皿選出4-8個進行比色測定,可避免因比色皿差異造成測量誤差。
  9. 比色皿在使用后,應立即用水沖洗干凈。必要時可用1:1的鹽酸浸泡,然后用水沖洗干凈。
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