技術文章
紫外分光光度計就是根據物質的吸收光譜研究物質的成分、結構和物質間相互作用的有效手段。紫外分光光度計可以在紫外可見光區任意選擇不同波長的光。物質的吸收光譜就是物質中的分子和原子吸收了入射光中的某些特定波長的光能量,相應地發生了分子振動能級躍遷和電子能級躍遷的結果。由于各種物質具有各自不同的分子、原子和不同的分子空間結構,其吸收光能量的情況也就不會相同,因此,每種物質就有其*的、固定的吸收光譜曲線,可根據吸收光譜上的某些特征波長處的吸光度的高低判別或測定該物質的含量。
校正方法
分光光度法的一個物理化學量是吸光度。為了獲得準確的研究結果,準確測得樣品溶液的吸光度是非常重要的。一般,分析結果的不可靠性與偶然誤差和系統誤差有關。偶然誤差影響測量的精密度,可通過足夠數量測量的統計處理來減少;系統誤差影響測量結果的準確度,可在大體相同實驗條件下,用比較一種物質的準確測量結果,使系統誤差統一起來。
而分光光度計的系統誤差(波長校正、分光光度計的慢散光、放大器的線性響應、暗電流和比色皿的光程)和操作誤差(溫度改變、儀器讀數、操作者的改變、使用物質的純度、稱量和濃度、pH)對測量吸光度的影響是可以檢查和校正的。關于操作誤差,多數情況下,通過嚴格按操作程序測量、儀器調零、準確稱量等來控制或減少這種誤差的產生。關于儀器的系統誤差,可通過對分光光度計的定期校正來克服,若所需準確度很高的測量,則必須天天校正。